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黄曲霉毒素M1的检测方法
- 点击1025次
- 发布:2013/4/10
黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1在动物体内的代谢产物,并能够进入乳汁,因此黄曲霉毒素Ml的检测对象一般都是动物的组织、乳及其制品。目前,黄曲霉毒素M1的检测方法有免疫亲和柱层析净化荧光光度法、免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法(IA- HPLC)、高效液相色谱法、薄层色谱法和酶联免疫吸附法等。下面具体介绍几种方法:
1)免疫亲和柱层析净化荧光光度法
试样经过离心、脱脂、过滤后,滤液经过含有黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体的免疫亲和柱层析净化,黄曲霉毒素M1交联在层析介质中的抗体上。此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一性,当样品通过亲和柱时,抗体选择性地与所有存在的黄曲霉毒素M1(抗原)键合。用甲醇水(10:90)将免疫亲和柱上杂质除去,以甲醇—水(80:20)通过免疫亲和柱洗脱,加入溴溶液衍生后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒索Ml含量。乳中黄曲霉毒素M1的检出限为0.1μg/L,乳粉中黄曲霉毒素Ml的检出限为0.1μg/kg。
2)免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法
该方法适用于乳、乳粉.以及低脂乳、脱脂乳、低脂乳粉和脱脂乳粉中黄曲霉毒素Ml含量的测定。免疫亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当样品通过亲和柱时,抗体选择性地与黄曲霉毒素M1(抗原)键合,形成抗体抗原复合体。用水洗柱除去柱内杂质,然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素M1,收集洗脱液,用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定洗脱液中黄曲霉毒素M1含量。乳粉中的最低检测限是0.08μg/kg,乳中的最低检测限是0.008μg/L。
3)薄层色谱法规定了牛乳及其制品、黄油及新鲜猪组织(肝、肾、血及瘦肉)等食品中黄曲霉毒素Ml的测定方法。试样经提取、浓缩、薄层分离后,黄曲霉毒素Ml在紫外光下产生蓝紫色荧光,根据荧光强度来测定含量。